脂溶性药物如何进行MTT实验操作

1、将脂溶性药物用DMSO溶解，不得大于1%，因为DMSO本身具有毒性，以免对细胞产生较大的毒性。

2、将消化好的细胞，家培养液进行细胞计数，并确定细胞总数（计数时给细胞计数板中加细弯挖峒擘胞悬液20ul，进行计数，计算公式:细胞个数/ml=四个方格细胞总数/4*10000）。

3、给每个well中加入200ul的细胞悬液，每个well中含有的细胞总数为10000个。

4、给96孔板外周一圈加PBS，然后将配好的细胞悬液加入其余60个空，细胞培养箱中培养24h，观察。

5、将细胞培养板中的细胞培养液吸走，将配置好的药物加入对应的板区，并给对照组中加入同实验组一定量的含DMSO细胞培养液。

6、将细胞置于培养箱中培养24h，48h，72h，再加5mg/ml的MTT溶液(用PBS配置)20ul。

7、培养4h后，再加150ul/well的DMSO溶液，再在摇床上震摇10min。

8、在酶标仪490nm下，读板，计算细胞抑制率。